Expression und Regulation des Chemokinrezeptors CCR-1 in Peritonealmakrophagen, Endometrium und Endometriosegewebe

Abstract

CCR-1 ist ein CC-Chemokinrezeptor mit hoher Affinität für RANTES (regulated upon activation, normal T-cell expressed and secreted) und MIP-1 alpha (macrophage inflammatory protein-1 alpha), zwei Chemokine mit chemotaktischer Wirkung auf Monozyten. Makrophagen, T-Lymphozyten und deren sezernierende Produkte IFN-gamma und TNF-alpha sowie die Chemokine RANTES und MIP-1 alpha sind in der Peritonealflüssigkeit von Endometriosepatientinnen nachweislich erhöht vorzufinden. In dieser Studie untersuchten wir die CCR-1-Expression in Peritonealmakrophagen, Endometrium und Endometriosegewebe und die Stimulation des Rezeptors in Peritonealmakrophagen und Stromazellen durch die Zytokine IFN-gamma und TNF-alpha. Das CCR-1-Protein, mit einem Molekulargewicht von 41 kDa, wurde mit der Westernblot-Technik quantifiziert. Native Peritonealmakrophagen von Endometriosepatientinnen exprimierten zweifach, und kultivierte Makrophagen dreifach mehr CCR-1-Protein als Makrophagen von Kontrollpatientinnen. In beiden Patientinnengruppen bewirkte die 48stündige Stimulation der Peritonealmakrophagen mit 2 µg IFN-gamma und 1 µg TNF-alpha einen zweifachen Anstieg der CCR-1-Expression. Die Stromazellen reagierten auf die Zytokinstimulation unterschiedlich: in Endometriosestromazellen wurde der CCR-1-Rezeptor hochreguliert, während er in Endometriumstromazellen dieser Patientinnengruppe runterreguliert wurde. In Endometriumstromazellen von Patientinnen ohne Endometriose wurde auch nach Stimulation kein CCR-1-Rezeptor exprimiert. Die Ergebnisse lassen auf den möglichen Einsatz von CCR-1-Rezeptorblockern als neue Therapieform in der Endometriosebehandlung schließen.

CCR1 is a CC-chemokine-receptor with high affinity for RANTES (regulated upon activation, normal T cell expressed and secreted) and MIP-1 alpha (macrophage inflammatory protein-1 alpha), two chemokines that attract monocytes. Macrophages, T-lymphocytes and their secreted products IFN-gamma and TNF-alpha as well as the chemokines RANTES and MIP-1 alpha are found at elevated levels in the peritoneal fluid of patients with endometriosis. In this study we analyzed the expression of CCR1 in peritoneal macrophages, endometrium and endometriotic tissue and its stimulation by the cytokines IFN-gamma and TNF-alpha in peritoneal macrophages and stromal cells. CCR1 protein with a molecular weight of 41 kDa was quantified by Western blotting. CCR1 protein in native peritoneal macrophages from patients with endometriosis was 2-fold greater, and in cultured peritoneal macrophages 3-fold greater, compared to patients without endometriosis. Stimulation of peritoneal cells with 2 µg IFN-gamma and 1 µg TNF-alpha revealed a 2-fold increase in CCR1 protein after 48 h. Cytokine-stimulation caused in stromal cells different reactions: CCR1 protein in endometriotic stromal cells was up-regulated and in endometrial stromal cells down-regulated. Even after stimulation, there was no CCR1 expressed in endometrial stromal cells from patients without endometriosis. Our results suggest that new therapeutic approaches for the medical treatment of endometriosis could include receptor blockers of CCR1 to mitigate inflammatory responses in this condition.